Dondurarak Kurutma Kültürlerinin Temelleri
Dondurarak kurutma olarak da bilinen liyofilizasyon, önce numunenin dondurulmasını ve ardından vakum altında çok düşük sıcaklıklarda kurutulmasını içeren, numuneden suyu uzaklaştırarak biyolojik materyali korumak için kullanılan bir işlemdir. Liyofilize numuneler, işlenmemiş numunelerden çok daha uzun süre saklanabilir.
Liyofilizasyon Neden Kullanılır?
Liyofilizasyon veya bakteri kültürlerinin dondurularak kurutulması, numunenin sıkı bir şekilde kurutulmasının neden olabileceği hasarı en aza indirirken, kültürleri uzun süreli saklama için stabilize eder. Pek çok mikroorganizma liyofilize edildiğinde iyi bir şekilde hayatta kalır ve uzun süreli saklama sürelerinin ardından kolayca yeniden hidratlanabilir ve kültür ortamında büyütülebilir.
Liyofilizasyon, aşıları, kan örneklerini, saflaştırılmış proteinleri ve diğer biyolojik malzemeleri korumak için biyoteknoloji ve biyomedikal endüstrilerinde de kullanılır.
Bu kısa laboratuvar prosedürü, kültür koleksiyonunuzu korumak için piyasada bulunan herhangi bir dondurarak kurutucu ile kullanılabilir.
Süreç
Liyofilizasyon işlemi aslında süblimasyon adı verilen fiziksel bir fenomenin uygulamasıdır: bir maddenin önce sıvı fazdan geçmeden katıdan gaz haline geçişidir. Liyofilizasyon sırasında donmuş numunedeki su, numuneyi önce eritmeden su buharı olarak uzaklaştırılır.
Yaygın hatalar
Liyofilizasyon söz konusu olduğunda en yaygın hatalardan biri, numunenizin erime noktasını bilmemektir, bu da doğru liyofilizatörün seçilmesini zorlaştırır. Numuneleriniz işlem sırasında eriyebilir. Diğer bir yaygın hata, raf tipi bir dondurarak kurutma makinesinde dondurarak kurutma yaparken daha soğuğun daha iyi olduğunu düşünmektir. Birincil kurutma sırasında, raf sıcaklığını numunenin ötektik sıcaklığının hemen altına ayarlamanız gerekir. Numune moleküllerini hareket etmeye teşvik edecek, ancak erimeyi önleyecek kadar ısı olmalıdır.
Üçüncü bir hata, numuneleriniz için yanlış ekipmanı kullanmaktır. Dondurarak kurutucular bir grup ortamında kullanıldığından, satın almadan önce aşağıdakileri bilmelisiniz:
- Ne kadar nem liyofilize edilecek
- Numune nedir (ve ötektik sıcaklık)
- Dondurarak kurutma makinesi nasıl doğru şekilde kullanılır?
Ünite doğru kullanılmazsa, tüm numuneleri bozabilir. Bu da bizi başka bir yaygın hataya getiriyor: Vakum pompasının bakımını yapmamak. Liyofilizasyonun çalışması için pompa mükemmel çalışır durumda olmalıdır. Pompanın dondurarak kurutma işleminden 30 dakika önce ve sonra balast gazı açıkken çalıştırılması pompanın ömrünü uzatacaktır. Gaz balastının açılması, iç bileşenlerin hasar görmesini önlemek için pompadaki kirleticileri temizler. Pompa yağında renk değişikliği ve partikül olup olmadığını sık sık kontrol etmeli ve gerekirse yağı değiştirmelisiniz. Düzenli yağ değişimleri, dondurarak kurutma işlemi sırasında pompanın optimum vakumda çekmesini sağlar.
Son olarak, liyofilizasyon işleminiz için yanlış dondurarak kurutma aksesuarlarına sahip olmak da büyük bir hata olabilir. Süpürgeniz altında bir tıpa numunesine mi ihtiyacınız var? Daha sonra bir durdurma odası gereklidir. Şişelerde dondurarak kurutma mı yapıyorsunuz? Ardından portları olan bir kurutma odasına sahip olduğunuzdan emin olun.
Yukarıdaki hatalardan kaçınarak liyofilize kurutucunuza ve pompanıza daha iyi bakım sağlayabilir, liyofilizasyon işleminiz bittiğinde daha iyi numuneler alabilirsiniz.
Kaynakça: https://www.thoughtco.com/lyophilization-preserving-biological-material-375590
